案例分析：高通量DSF方法快速篩選曲妥珠單抗的制劑配方

　　生物抗體的配方是確保穩(wěn)定產品的生產、儲存和運輸的基礎。配方的開發(fā)過程，需要采用高通量方法來可靠、快速地篩選大量配方條件，以確定*佳的制劑和”好的條件。一種廣泛使用的方法是做熱變性測試和推導相關參數，如Tm和Tonset，以對配方條件和輔料的穩(wěn)定效果進行分級篩選。
 

　　傳統(tǒng)的無標記熱變性技術受到通量上的限制，比如樣品濃度、體積、耗材成本和測量速度等等，這使有成百上千種潛在條件的配方端選過程成為一個挑戰(zhàn)。
 

　　在本報告中，我們將展示使用SUPR-DSF儀器，基于熱變性這一參數，在96種不同條件下對曲要珠單抗的配方進行分析和情選，篩選穩(wěn)定劑時，獲得的結果與差示熱掃描量熱:DSC法獲得的結果一致，該配方也已經被商業(yè)化用于赫賽汀靶向藥。配方的篩選是在一個384孔微孔板中，用時不到1.5小時就獲得了全部結果。這種音通量的篩選可以集成到實驗室化自動化系統(tǒng)，實現每天選數千個樣品。
 

　　結果：
 

　　測量的變性曲線(圖1和圖2為示例)顯示了兩個獨立的變性過程。通過標準三態(tài)模型[1]對變性數據進行*小二乘法擬合，確定了Tm值、范待霍夫焓(ΔH)和Tonset值，并列于表1中。
 

　　該表也列出了為了提高抗體穩(wěn)定性所篩選的輔料。基于三態(tài)模型所獲得的實驗結果與曲妥珠單抗[2]的DSC數據一致，都報告了700C和82oC附近的兩個Tmn值。考慮到樣品和溶劑的變化，Tm值與基它報告的值一致[2]。
 

　　除了相似的Tm值之外，SUPR-DSF數據證實組氨酸和海藻糖二水合物既不阻礙也不提高曲要珠單抗的構象穩(wěn)定性，這些都是含于*赫寒汀的曲要珠單抗的配方成分[3]。這兩點有助于證明SUPR-DSF測量的一致性和高通量測試的能力。