高通量DSF分析儀在生物藥物研究、蛋白質穩定性分析等領域有著廣泛的應用，DSF，即差示掃描熒光法(Differential Scanning Fluorimetry)，是一種基于蛋白質熱變性過程的熒光檢測方法。它通過在熒光定量PCR儀上緩慢加熱樣品，并在加熱過程中檢測熒光信號的變化來評價蛋白質的熱穩定性。根據熒光信號來源的不同，DSF可以分為兩類：染料法和無標記法(Nano DSF)。
染料法：常用的熒光染料是SYPRO Orange。這是一種環境敏感的疏水染料，當溫度升高時，蛋白去折疊，疏水部分暴露出來，染料與蛋白質的疏水部分特異性結合，導致熒光增強。通過監測熒光強度的變化，可以計算出蛋白質的熔解溫度(Tm)。
無標記法(Nano DSF)：這種方法基于蛋白去折疊過程中色氨酸發射光譜的位移進行檢測。色氨酸殘基在蛋白質疏水內核中時，其內源熒光發射波長較短；而當蛋白質去折疊，色氨酸暴露于親水環境時，其內源熒光發射波長會發生紅移。通過監測這種熒光變化，可以在非標記環境下評估蛋白質的熱穩定性。
高通量DSF分析儀結合了DSF技術的優勢，并實現了高通量分析。其主要特點包括：
高通量：采用標準的384微孔板，一次實驗可以分析多個樣品，大大提高了分析效率。
快速分析：一個升溫過程(如60-80分鐘)內即可完成384個樣品的穩定性分析與篩選。
無需特殊耗材：使用標準的384孔板，無需特殊的耗材和毛細管，降低了實驗成本。
內源熒光檢測：Nano DSF方法無需對待測樣品進行任何標記，也無需使用任何熒光探針，即可快速測量整塊樣品微孔板。
高通量DSF分析儀在多個領域都有廣泛的應用，包括但不限于：
蛋白質穩定性分析：評估蛋白質在不同條件下的穩定性，如溫度、pH值、離子強度等。這對于理解蛋白質的結構與功能關系、優化蛋白質藥物的生產和儲存條件具有重要意義。
藥物篩選：通過高通量篩選技術，快速篩選出與靶蛋白結合的候選藥物。這有助于加速藥物研發進程，提高藥物篩選的效率和準確性。
蛋白質結構研究：研究蛋白質的結構和構象變化，為蛋白質結晶等研究提供有力支持。DSF技術可以揭示蛋白質在不同條件下的結構變化，為理解蛋白質的功能和機制提供重要線索。
關注微信